外泌体研究

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ESQ外泌体示踪试剂盒

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ESQ外泌体示踪试剂盒

华盈生物开发了ESQ3外泌体快速荧光标记试剂盒，最大的优点是标记全程无需超速离心，而且30分钟内即可完成外泌体荧光标记与纯化，得到的荧光标记外泌体可用于细胞吞噬与示踪实验。

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产品编号

所属分类

外泌体试剂/仪器

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产品描述

外泌体是由细胞分泌的直径约为30~150nm的小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构。外泌体携带多种功能分子如蛋白、核酸和脂质，参与细胞间的交流、物质运输以及正常的生理过程维持，与疾病的发生进展密切相关。外泌体功能研究中首先需要荧光标记外泌体示踪其是否被受体细胞摄取。然而，荧光标记外泌体结束后是否能够完全去除游离荧光，往往会影响后续实验结果的可靠性。

常规去除游离荧光需要用到超速离心，然而该方法不仅设备昂贵，而且耗时长，回收率低，增加了实验的难度和风险。为了解决以上难点，华盈生物开发了外泌体快速荧光标记试剂盒（Exosome Staining Q Kit，ESQ），该试剂盒最大的优点是标记全程无需超速离心，而且30分钟内即可完成外泌体荧光标记与纯化，得到的荧光标记外泌体可用于细胞吞噬与示踪实验。

| 产品特点

操作快速：一次全反应仅需20分钟

过程便捷：无需大型仪器，一般实验室均可满足

标记效率高：10μg外泌体标记效率大于90%

纯化效果好：有效去除90%以上游离荧光

回收率高：10μg外泌体回收率大于70%

| 试剂盒实测数据

荧光分光光度计检测经过荧光吸附柱(试剂盒中提供)前后的荧光染料，结果显示荧光吸附柱纯化后的染料相对荧光单位显著下降。表明荧光吸附柱可有效去除游离荧光（图1）。

图1 荧光吸附柱去除游离荧光测试

取5μg ，10μg尿液外泌体分别进行3次荧光标记，经纳米流式NanoFCM检测，标记效率均大于90%，且具有良好的重复性（图2）（注意：不同起始量的不同来源外泌体的标记效率以实际标记结果为准）。

图2 外泌体标记效率测试

取5μg ，10μg尿液外泌体分别进行3次荧光标记（绿色）重复实验，纯化后的外泌体，经qNano（TRPS外泌体计数技术）计数检测，标记后的外泌体的回收率均大于70%，且具有较好的重复性（图3）（注意：不同起始量的不同来源外泌体的回收效率以实际回收结果为准）。

图3 荧光标记外泌体的纯化回收率测试

终浓度5μg/ml PKH67荧光标记的尿液外泌体与Raw264.7细胞共孵育0h、4h、24h，流式细胞仪检测结果显示荧光信号逐渐增强，说明吞噬外泌体的细胞数量随着孵育时间的延长而增加（图4）。

图4 流式检测细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体

终浓度36μg/ml 红色荧光标记的HeLa细胞外泌体，与3T3细胞共孵育24h，细胞骨架和细胞核分别用鬼笔环肽和 DAPI 标记，激光共聚焦显微镜扫描结果表明：标记的外泌体 (红) 定位于3T3细胞核周区域，证实了外泌体被内化。

图5 共聚焦显微镜观察细胞吞噬荧光标记纯化的外泌体（400×）

点击下载：ESQ外泌体示踪试剂盒产品说明书

| 客户文献

He S, Wang Q, Chen L, He YJ, Wang X, Qu S. miR-100a-5p-enriched exosomes derived from mesenchymal stem cells enhance the anti-oxidant effect in a Parkinson's disease model via regulation of Nox4/ROS/Nrf2 signaling. J Transl Med. 2023;21(1):747.（南方医科大学南方医院） IF=6.1

关键词:

外泌体、外泌体示踪、外泌体功能实验