这是描述信息

新闻资讯

新闻资讯
留言咨询
与最新消息保存同步
/
/
Cell Reports Medicine(IF=14.3):磷酸化抗体芯片助力研究者发现急性髓性白血病耐药的关键信号通路蛋白

Cell Reports Medicine(IF=14.3):磷酸化抗体芯片助力研究者发现急性髓性白血病耐药的关键信号通路蛋白

  • 分类:华盈视角
  • 作者:小王
  • 来源:华盈生物公众号

【概要描述】磷酸化抗体芯片助力研究者找到导致急性髓性白血病耐药的关键蛋白

Cell Reports Medicine(IF=14.3):磷酸化抗体芯片助力研究者发现急性髓性白血病耐药的关键信号通路蛋白

【概要描述】磷酸化抗体芯片助力研究者找到导致急性髓性白血病耐药的关键蛋白

  • 分类:华盈视角
  • 作者:小王
  • 来源:华盈生物公众号
  • 发布时间:2023-12-14 09:21
  • 访问量:
详情

急性髓性白血病(AML)是一种以造血细胞异常分化和克隆性增殖为特征的血液系统恶性肿瘤,25%-30%的急性髓系白血病 (AML) 患者存在 FMS 样酪氨酸激酶-3(FLT3)的内部串联重复突变(ITDs),并与不良预后相关。多种FLT3抑制剂已被批准用于治疗Flt3-ITD的AML患者, 然而,患者容易对FLT3 抑制剂产生耐药。2023年11月,来自同济大学和上海交通大学的研究者在Cell Reports Medicine(IF=14.3)上发表了题为“A combinatorial therapeutic approach to enhance FLT3-ITD AML treatment”的研究论文。作者采用来自华盈生物的CSP100 Plus磷酸化广谱筛选抗体芯片检测关键信号通路上蛋白的磷酸化和表达,进而发现p53的去泛素化和蛋白稳定性与Flt3抑制剂耐药之间有着密不可分的关系。

|   01、抑制Flt3基因表达导致Flt3-ITD AML中的p53下调

作者首先用CSP100 Plus抗体芯片检测了Flt3抑制剂奎扎替尼(Quizartinib)对表达Flt3-ITD的MV4-11细胞中信号通路的影响。奎扎替尼抑制了许多与癌症相关的信号通路(图1A)。重要的是,减少了几个与p53信号通路相关的蛋白的表达,包括促凋亡蛋白p53、caspase-3和BID,p53是下调幅度最大的蛋白之一(图1B)。GSEA分析也表明,奎扎替尼抑制了p53信号转导(图1C)。作者用奎扎替尼处理表达Flt3-ITD的MV4-11和MOLM-13细胞以及人Flt3-ITD AML的原代细胞,WB验证实验也表明确实降低了这两种细胞中的p53蛋白水平(图1D、E)。

图1 抑制Flt3基因表达导致Flt3 ITD AML中的p53下调

|   02、p53的下调促进Flt3-ITD AML耐药

作者敲除p53后发现奎扎替尼在MV4-11细胞中的IC50增加了(图2A),并且敲除p53的MV4-11细胞对奎扎替尼诱导的细胞凋亡更具抵抗力(图2B),研究还证实了过表达野生型p53的而不是乙酰化缺陷突变体可以使这些细胞对奎扎替尼重新敏感(图2C)

图2 p53的下调促进Flt3-ITD AML耐药 

|   03、蛋白酶体抑制剂阻断p53蛋白降解可提高对Flt3抑制的敏感性

作者发现奎扎替尼对p53 mRNA表达水平没有明显影响(图3A),于是用CHX实验证实抑制Flt3显著降低了p53蛋白的稳定性(图3B)。奎扎替尼抑制Flt3增加了p53的K48特异性泛素化,说明奎扎替尼可能是通过影响泛素-蛋白酶体途径来下调p53表达的。奎扎替尼和蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bortezomib)联合处理显著诱导细胞内p53蛋白表达,并降低原代Flt3-ITD AML细胞的细胞存活率和集落形成能力(图3D-3F)。说明抑制泛素-蛋白酶体途径可以恢复细胞内p53的表达和功能。

图3 蛋白酶体抑制剂阻断p53蛋白降解可提高对Flt3抑制的敏感性

|   04、MYC/USP10信号对Flt3-ITD AML中p53泛素化和蛋白稳定性的调节

作者利用公共数据集分析了E3连接酶和去泛素酶在MV4-11细胞以及在Flt3被抑制后MLL-AF9和Flt3-ITD共表达的小鼠白血病细胞中的表达。只有5种去泛素酶(DUBS)-USP10、USP31、USP36、USP14和USP1在所有细胞中下调 (图4A)。其中只有USP10被报道使p53去泛素化,抑制Flt3可降低USP10蛋白和mRNA水平(图4B和4C),蛋白酶体抑制剂硼替佐米能部分恢复USP10基因敲除细胞中p53的表达(图4D)。并且敲除USP10后,p53的K48特异性泛素化水平增加(图4E),USP10的过表达延长了p53的半衰期(图4F)。GSEA分析发现奎扎替尼处理后, MYC的下调最明显(图4G)。敲除MYC基因降低了USP10的表达(图4H)。而USP10的敲除完全取消了MYC过表达诱导的p53蛋白上调(图4I)。总之,MYC激活USP10使p53去泛素化,并促进其蛋白质稳定性。

图4 MYC/USP10信号对Flt3-ITD AML中p53泛素化和蛋白稳定性的调节

|   总结与讨论

Flt3-ITD AML是AML的一个亚型,患者总体预后较差,并且大多数FLT3-ITD AML患者在Flt3抑制剂治疗后不久就会因适应性耐药而复发。这篇论文中,作者揭示了Flt3抑制剂诱导的p53蛋白降解是Flt3-ITD AML耐药的关键机制,抑制Flt3会导致p53泛素化和蛋白酶体降解,MYC/USP10信号在调节Flt3-ITD AML中的p53蛋白稳定性方面具有潜在的作用。这篇文章使用了CSP100 Plus磷酸化抗体芯片,快速地找到了p53这个关键蛋白,为研究带来很大便捷。

华盈生物提供多通路和单通路多种类型的芯片检测服务

|   相关文献

ong J, Chen X, Shen Y, Lei Y, Mu L, Wang Z, Xiang R, Gao W, Wang L, Wang L, Jiang J, Zhang W, Lu H, Dong Y, Ding Y, Zhu H, Hong D, Sun YE, Hu J, Liang A. A combinatorial therapeutic approach to enhance FLT3-ITD AML treatment. Cell Rep Med. 2023 ;4(11):101286.

相关产品

暂时没有内容信息显示
请先在网站后台添加数据记录。
华盈生物

地址:上海市闵行区绿洲环路396弄5幢4层

电话:400-869-2936,021-33968791

邮箱:support@wayenbiotech.com

传真:021-33938792

QQ:2120485725

战略合作

战略合作

发布时间:2021-08-11 17:21:10

|    Full Moon    |    RayBiotech    |    CDI    |    IZON    |    Bio-Rad    |    R&D Systems    |    IsoPlexis    |    南模生物    |    欧易生物    |    其明信息    |    美吉生物    |    麦特绘谱    | 

 

特别说明:本网所有网页均为华盈生物原创信息,转载必须征求华盈生物同意,并同时注明本网名称及网址。

专利代码

发布时间:2023-06-09 17:38:30
Copyright © 2021 上海华盈生物医药科技有限公司 版权所有
搜索
搜索
关闭
客户留言
验证码