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外泌体提取的方法

外泌体提取的方法

【概要描述】外泌体提取是大小为30-200nm的小膜泡,存在于血液、尿液、羊水、恶性肿瘤、腹水等体液和细胞培养上清液中。外泌体提取携带大量的特定蛋白质、功能RNA等生物活性分子,与体内各种疾病的发生发展密切相关。

外泌体提取的方法

【概要描述】外泌体提取是大小为30-200nm的小膜泡,存在于血液、尿液、羊水、恶性肿瘤、腹水等体液和细胞培养上清液中。外泌体提取携带大量的特定蛋白质、功能RNA等生物活性分子,与体内各种疾病的发生发展密切相关。

  • 分类:近期动态
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  • 发布时间:2022-05-30 10:02
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外泌体提取是大小为30-200nm的小膜泡,存在于血液、尿液、羊水、恶性肿瘤、腹水等体液和细胞培养上清液中。外泌体提取携带大量的特定蛋白质、功能RNA等生物活性分子,与体内各种疾病的发生发展密切相关。由于外泌体提取携带重要的生物信息,因此具有非常重要的潜在应用价值。一方面,外泌体提取可以作为疾病的诊断标志物,另一方面,外泌体提取可以作为一种治疗方法。有望在未来将外泌体提取用于疾病的治疗。正因为如此,关于外泌体提取的研究持续火热。

外来体研究的主要任务是提取和纯化外来体。外泌体提取的方法有很多种,那么用哪种方法外泌体提取呢?

|   一、超速离心法

原理:基于不同的颗粒密度和不同的沉降系数,通过交替的低速离心和高速离心来分离外来体颗粒。

优点:参考资料多。如果实验室设备条件满足,可以节约成本。

缺点:需要大型离心机,离心力大会破坏外来体;操作耗时;繁琐的步骤;输出不稳定(受转子、转速、初始样本量等因素影响);对初始样本量的高要求

|   二、密度梯度离心

原理:在超高速离心力的作用下,氯化铯或蔗糖等介质形成密度层级,通过密度梯度离心使外泌体沉降在一定的密度范围内。

优点:纯度比较高。

缺点:操作非常复杂耗时,需要大型离心机。

|   三、免疫磁珠法

表面包被抗体的磁珠与外来体囊泡孵育后,能特异性识别外来体特异性标记物(CD9、CD81、CD63等。).

优点:操作简单,纯度高。

缺点:成本高;产量少,只能收集一种外泌体,损失多;繁琐的步骤;物种特异性限制;需要磁架、冷冻离心机等仪器。

|   四、PEG沉淀法

聚乙二醇(PEG)可以与水分子形成网络结构,捕获一定大小的外来体。

优点:操作简单;不需要大型离心机和其他仪器

缺点:市面上品牌很多,大多可靠性差;发表的文章容易被质疑等。

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