胃癌前病变（PLGC）是指以胃黏膜萎缩为基础的胃黏膜的异型增生和肠上皮化生，防治PLGC对降低胃癌发病率具有重要意义。由于PLGC病因病机复杂，西医尚无统一有效的治疗方案。近年来，中医药凭借其多途径、多靶点的综合干预特点，在PLGC的治疗和预防方面显示出明显的优势。慢痞消汤（MPX，Manpixiao decoction）是一种中药方剂，主要用于改善PLGC患者胃黏膜组织病理学改变，缓解不适症状。然而，MPX在PLGC治疗中的作用机制尚不清楚。

2022年8月，北京中医药大学脾胃病研究中心丁霞教授课题组在药学专业期刊Front Pharmacol（IF=5.988）上发表了题为“Manpixiao Decoction Halted the Malignant Transformation of Precancerous Lesions of Gastric Cancer: From Network Prediction to In-Vivo Verification”的研究论文，通过整合网络药理学和体内实验研究了慢痞消汤对胃癌前病变的保护作用并揭示其参与机制。

研究首先采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用技术（UPLC-Q-Exactive）检测MPX干预后的大鼠血清样品中的活性成分，基于中药成分高分辨质谱数据库（OTCML，1200余种中药化合物）采用电喷雾离子源（ESI）正、负离子同时扫描模式鉴定了426和459个化合物。结合文献数据，确认了MPX含药血清的46种主要活性成分，包括3种酚酸、4种丹参酮、9种生物碱、19种黄酮类化合物、5种萜类化合物和6种其他成分（图1）。

图1 慢痞消汤入血成分鉴定

为了探究MPX的潜在靶点和机制，研究人员下载了PLGC或早期胃腺癌（EGC）不同阶段的GEO数据（GSE55696和GSE130823），通过 R 包“sva”集成到一个GEO数据集（n = 171）中，将差异表达基因（FC>2，p<0.05）进行GSEA分析，发现免疫相关通路（IL6/JAK/STAT3、IL2/STAT5、NF-kB、干扰素 α/γ等）和恶性肿瘤相关通路（EMT、P53和KRAS等）的活性随着病理进展逐渐增加（图2A）。进一步利用网络药理学分析，筛选出76个可能的靶基因作为潜在靶点进行PPI 、GO和KEGG分析。从PPI网络中发现了三个重要的模块，其中Cluster1富含PI3K-Akt 信号通路，Cluster2中含有的EGFR基因是PI3K-AKT信号通路的关键上游基因，表明MPX可能通过上述信号通路作用于PLGC（图2B）。GO分析表明靶基因参与蛋白激酶调节活性和激酶调节活性，KEGG通路分析显示PI3K-AKT信号通路作为富集评分最高的通路（图2C）。

图2 MPX的潜在靶点和机制的预测

动物实验发现口服慢痞消汤8周后可使大鼠肿瘤发生率由71.43%降低至35.71%。由于慢性炎症与胃癌前病变高度相关，研究利用 Luminex芯片评估了不同组的血清中23种关键炎性细胞因子水平，发现PLGC模型组12个细胞因子较对照组升高，特别是IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-7、CSF-1、CSF-3和TNF-α，其中12种细胞因子在MPX煎剂干预后下调，如IL-1α、IL-7、CSF-1和CSF-3（图3A、B）。进一步对正常组、模型组和MPX组的胃黏膜组织进行了磷酸化抗体芯片（CSP100 Plus）分析16个关键的肿瘤和免疫相关信号通路，发现EGFR-PI3K-Akt通路和EMT通路与MPX的抗PLGC作用高度相关（图3C），结果也通过WB得到验证（图3D）。

图3 体内实验验证MPX的作用机制

总之，MPX可通过减轻全身炎症反应和抑制局部胃黏膜EGFR-PI3K-AKT相关EMT通路来阻止PLGC的进展。

本研究为复方研究的几个经典案例，首先对复方进行了入血成分的鉴定，确认了MPX含药血清的主要活性成分。随后应用网络药理学分析和生物信息学分析方法，发现影响慢性胃炎恶变过程的关键分子群和信号通路网络，探索了MPX可能的作用机制。最后通过体内实验采用细胞因子芯片和磷酸化抗体芯片（华盈生物提供了细胞因子芯片和磷酸化抗体芯片技术服务）进行了机制的挖掘和验证，阐明了MPX可通过减轻全身炎症反应和抑制局部胃黏膜EGFR-PI3K-AKT相关EMT通路来阻止PLGC的进展的分子机制。

很多名方古方经过上千年的临床实践验证，其疗效得到了医生和病人的广泛认可。然而，在高质量的SCI杂志中关于中药复方的机理与临床观察相关研究报道均屈指可数。

其主要原因在于，

1）SCI科学体系的基础是要求可重复性，中医复方制剂的标准化成为主要门槛。

2）面对中药中成百上千的成分，如何快速、高效地筛选出其中的药效活性成分。基于血清药物化学的中药活性成分筛选是一种体内的筛选方法，其核心思想是入血成分可能是中药有效成分。

3）中药多靶点的特点与机理的复杂性，是制约中药复方开展深入研究又一瓶颈。中药复方对实体组织和细胞的信号通路调控一定是复杂的。传统的研究方案仅仅通过前人报道，选取个别信号通路和蛋白质，利用RT-PCR或者Western blot进行检测，很难获得全面的有说服力的结果，与中药的复杂性不能匹配。而采用网络药理学等生物信息手段，分析出的药物调控通路又没有广泛的实验证据的验证支持。

本研究中，作者选用了CSP100 Plus磷酸化信号通路广谱筛选抗体芯片，对大多数经典信号通路均进行了系统筛选，数据具有广泛性和说服力。通过数据分析发现的EGFR-PI3K-Akt通路参与到PLGC的形成，符合经典的病理学认知。

达吉特专注于药靶研究，可为您寻找药物靶点提供多种多样的专业的技术服务和解决方案，助您解决药物靶点-机理研究中的各种难题。

 

达吉特针对于中药及小分子药物研究，建立了一套完整的技术服务体系：

1）中药/复方的有效成分及代谢产物分离与鉴定；

2）血清/组织药代动力学分析

3）小分子化合物生物素批量标记

4) 小分子靶点筛选：20K芯片，DARTS，Pull down+质谱

5）药物调控信号通路筛选：磷酸化抗体芯片，蛋白质组学

6）网络药理学与计算机分子对接

7）SPR表面等离子共振（分子动力学）

|   相关文献

Li Y, Li T, Chen J, et al. Manpixiao Decoction Halted the Malignant Transformation of Precancerous Lesions of Gastric Cancer: From Network Prediction to In-Vivo Verification. Front Pharmacol. 2022 Aug 5;13:927731.