ABPP:基于活性的蛋白质组学分析服务

进一步，通过LC-MS分析出小分子的潜在靶点蛋白谱。由于炔基的基团很小，其标记的小分子不仅对其活性结构的影响小，而且对其溶解度及进入细胞的能力也几乎不存在干扰。因此，ABPP可以活细胞或活体动物组织内筛选小分子的结合靶点蛋白，是一种拥有广阔前景的小分子靶点筛选技术。

|   技术路线

|   技术优势

|   经典案例：ABPP技术发现雷公藤红素改善肝纤维化靶点

雷公藤红素是明星小分子天然产物，具有多靶点多功能性的特点。本研究发现雷公藤红素有改善肝纤维化的功能。为识别雷公藤红素的潜在靶点蛋白，探索其改善肝纤维化的具体机制，研究人员设计并合成了带有炔基基团的雷公藤红素探针（Cel-P）。进一步，将Cel-P与人LX-2进行孵育，提取蛋白后，通过点击化学将Cel-P连接到带有叠氮的磁珠上进行Pulldown和质谱实验（即为ABPP）。ABPP实验发现Cel-P直接与过氧化还原蛋白（PRDX）家族成员有广泛的结合，还可与血红素加氧酶 1 (HO-1)直接结合。

通过一系列的功能实验，研究人员最终证实雷公藤红素在不影响蛋白表达的情况下，可以通过修饰其活性半胱氨酸位点Cys83 和 Cys173来抑制PRDX蛋白的酶活性，进而增加活化的小鼠肝星状细胞HSC中ROS的含量。此外，雷公藤红素还可通过结合并上调HO-1的表达增加Fe2+和脂质过氧化物LPO的累积。这些物质的累积可以进一步诱导活化的HSC发生铁凋亡，从而改善肝纤维化的症状。

该研究通过揭示雷公藤红素改善肝纤维化的直接蛋白靶点和分子机制，为雷公藤红素用于肝纤维化治疗提供了重要依据。

|   代表性文献

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