骨髓纤维化（myelofibrosis, MF）是一种慢性骨髓增殖性肿瘤（MPN），以克隆性造血、进行性骨髓纤维化和造血微环境（niche）破坏为特征。脾肿大（splenomegaly）是 MF 的标志性临床特征，长期以来被视为骨髓衰竭后髓外造血（extramedullary hematopoiesis, EMH）的代偿性结果。然而，脾脏间充质基质（mesenchymal stroma）在疾病进展中的主动贡献一直不清楚。近期，《Cell Stem Cell》发表了一篇题为 "Spatial profiling of the spleen in mouse and human myelofibrosis reveals complement-driven immune-stromal interactions as a therapeutic target" 的研究。该研究整合空间转录组（Visium/HD）、单核 RNA 测序（snRNA-seq）、单细胞 RNA 测序（scRNA-seq）与PCF空间蛋白组（CODEX），系统绘制了MPN 脾脏髓外造血微环境的图谱，揭示了网织细胞（reticular cells, RCs）从"支持造血"向"促炎促纤维化"的动态重编程，并将补体 C3 确立为可干预的基质治疗靶点。

该研究的人类发现队列纳入了12 例FFPE脾脏样本开展Visium空间转录组，包括9 例 MPN 患者和 3 例健康对照，其中 8 例（6 例 MPN、2 例对照）进行了 snRNA-seq。整体上，MPN 脾脏呈现白髓显著减少、红髓扩张，红髓 RCs（WT1+）与白髓 RCs（CCL19+）两类网织细胞得以区分；空间去卷积进一步揭示白髓 RCs 在 MPN 中脱离 B 细胞和 CD4+ T 细胞、部分迁移到血管周围，提示脾脏免疫结构被主动重塑。

为了在可控时间轴上追踪脾脏重塑的动态过程，研究采用了两个互补的小鼠模型：ThPO 过表达模型（代表原发性血小板增多症/继发性 MF，在移植后 4、6、8 周分别对应早、中、晚期）与侵袭性 MPLW515L 模型（代表原发性 MF，4 周内即出现重度纤维化和脾肿大）。PCF空间蛋白组（CODEX）使用了35 种抗体，对 4 例对照、4 例 ThPO 终末期、3 例 MPL 脾脏切片进行成像，结果显示白髓的B 细胞区和 T 细胞区随疾病进展逐步消失，红髓单核/粒细胞/巨噬/红系 cluster 沿"对照→ThPO→MPL"梯度递增。scRNA-seq也揭示了红髓RCs 是 ThPO 小鼠中转录改变最显著的 cluster。这些结果表明，脾脏重塑在纤维化早期即已启动，而非晚期骨髓衰竭的代偿性反应，且红髓 RCs 扮演关键角色。

红髓RCs轨迹从"造血支持"状态逐渐转向"促炎促纤维化"状态（上调 TGF-β、胶原形成、ECM 组织、IFN-γ 反应、补体激活等通路）。同时，巨核细胞高表达 TGFB1，RCs 上调 TGF-β 受体，PCF空间蛋白组确认胶原沉积随疾病进展增加、呈现特征性的席纹状（storiform）纤维化模式，提示巨核细胞通过TGF-β 信号驱动邻近 RCs 的促纤维化重编程。

人和小鼠数据均显示MPN 脾脏红髓与白髓 RCs 补体通路过度激活，其中 C3（补体级联的核心效应分子）在白髓 RCs 中特异性上调，血清 C3a 水平在 MPN 患者（n=40）中显著高于健康对照（n=12），提示存在系统性补体激活。PCF空间蛋白组显示对照中C3 局限于血管周围与白髓 RCs，而 ThPO 与 MPL 脾脏中 C3 与 CXCL12 在红髓、白髓广泛扩张表达。功能验证结果显示受体C3 缺陷显著减轻脾肿大与骨髓纤维化、恢复脾脏滤泡结构、增加循环淋巴细胞数量。最后，在患者来源的骨髓类器官模型中，用临床在研的 compstatin 类 C3 抑制剂AMY-101处理 JAK2V617F+ CD34+ iHSPCs 移植的类器官，7 天内即减少巨核细胞与 CD16+ 单核细胞，并在蛋白水平显著降低 COL1A1、FAP 与 TGFB，证实药物性补体抑制同样可抑制促炎促纤维化表型。

这项研究颠覆了"MF 脾肿大仅是 EMH 代偿位点"的传统认知，证明 MF 脾脏是一个被主动重塑的免疫-纤维化器官：网织细胞在巨噬细胞与巨核细胞来源信号的驱动下，从支持造血转向促炎促纤维化状态，并通过补体（尤其 C3）介导基质激活与基质重塑。由于 pegcetacoplan 等 C3 抑制剂已获批用于阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH），AMY-101 等新一代抑制剂亦在临床开发中，这一发现为 MPN/MF 的基质靶向治疗提供了可快速转化（repurposing）的候选策略。研究的创新性在于将空间转录组、单细胞多组学与PCF空间蛋白组在多物种、多阶段中整合，将脾脏基质微环境确立为MF 的可干预治疗轴，为理解造血微环境的补体依赖性调控提供了新的科学基础。

| 参考文献

Dugué B., Wanner P., Ruiz Tejada Segura M.L., et al. Spatial profiling of the spleen in mouse and human myelofibrosis reveals complement-driven immune-stromal interactions as a therapeutic target. Cell Stem Cell. 2026. DOI: 10.1016/j.stem.2026.07.012.