近年来，辅助生殖技术（ART）不断发展，但体外受精（IVF）仍无法完全模拟人体输卵管微环境。越来越多研究认为：受精后的早期胚胎并不是"独立发育"，而是持续接受母体输卵管分泌物（Fallopian tube fluid）的调控。其中最重要的调控因子之一，就是输卵管来源外泌体（oviduct extracellular vesicles，oEVs）。动物研究已经发现：牛、猪、小鼠、犬输卵管EV均可促进囊胚形成、降低ROS、改善胚胎质量。然而，人类输卵管EV究竟携带哪些功能蛋白？哪些是真正发挥作用的关键分子？一直缺乏系统研究。

近期，华中科技大学同济医学院附属同济医院靳镭/隋聪团队在《Journal of Extracellular Vesicles》（IF=21.7）上发表了题为“Extracellular Vesicles From Human Fallopian Tubes Enhance IVF Embryo Development and Contain Functional Proteins Including YWHAZ”的文章，整合人胚胎培养、输卵管外泌体蛋白组学、多数据库交叉分析、CRISPR功能验证及工程化EV递送等技术，成功鉴定6505种外泌体蛋白，并锁定关键功能蛋白YWHAZ，为优化IVF胚胎培养体系提供了新的理论依据。（华盈生物为该项研究提供了外泌体蛋白组学分析服务，为关键功能蛋白筛选提供了重要数据支撑）。

|   主要发现

1.输卵管外泌体可改善IVF胚胎发育质量

首先，研究团队收集了27例育龄期女性输卵管冲洗液，通过差速超速离心结合Exosupur二次纯化获得高纯度oEV，并采用透射电镜（TEM）、纳米颗粒跟踪分析（NTA）及Western blot（CD9、CD81、ALIX阳性，CALNEXIN阴性）完成外泌体鉴定。随后，将获得的oEV添加至IVF胚胎培养体系，结果显示，oEV能够被人早期胚胎快速摄取，并显著提高优质Day 3胚胎率和囊胚形成率，同时降低胚胎碎片率、活性氧（ROS）水平及细胞凋亡比例，提示输卵管外泌体能够改善体外培养环境，提高胚胎发育质量。

2.Label-free蛋白组学构建人输卵管外泌体蛋白图谱

为解析输卵管外泌体发挥生物学功能的物质基础，研究人员采用Label-free定量蛋白组学技术对oEV进行系统分析（华盈生物为该研究提供了Label-free定量蛋白组学服务），共鉴定到6505种蛋白质。进一步分析发现，仅13.5%的高丰度蛋白（878种）便贡献了75%的总蛋白信号。GO分析显示这些蛋白显著富集于Extracellular vesicle、Exosome等细胞组分，KEGG富集于吞噬体、补体与凝血级联、肌动蛋白骨架调控等通路，为后续功能蛋白筛选提供了坚实的数据基础。

3.多数据库交叉分析锁定关键功能蛋白YWHAZ

在蛋白组学数据基础上，研究进一步将输卵管外泌体蛋白与输卵管液蛋白组、干细胞来源EV蛋白组、体内发育小鼠胚胎及牛胚胎蛋白组等多个公开数据库进行交叉比对，共筛选出49个保守蛋白，其中YWHAZ、PEBP1、PKM、CKB和ARHGDIA五种蛋白在所有数据集中均高度保守。结合表达丰度及功能分析，最终确定YWHAZ为最具潜力的关键功能蛋白。

4.YWHAZ是维持胚胎发育的重要调控因子

研究进一步采用CRISPR/Cas9构建YWHAZ缺失胚胎，并结合RNA-seq、ROS检测、TUNEL及免疫荧光等实验开展功能验证。结果发现，YWHAZ缺失导致谷胱甘肽代谢相关通路受抑，氧化应激及细胞凋亡明显增加，虽然胚胎能够发育至囊胚阶段，却无法正常存活至出生，说明YWHAZ对维持胚胎氧化还原稳态及后续发育至关重要。

5.工程化外泌体实现YWHAZ递送，为IVF优化提供新策略

为验证YWHAZ的应用潜力，研究构建了富含YWHAZ的工程化外泌体，并将其加入胚胎培养体系。结果显示，工程化外泌体能够有效递送YWHAZ至胚胎细胞，降低ROS水平和细胞凋亡，改善体外培养胚胎的发育能力，证实外泌体可作为功能蛋白递送载体，为优化IVF培养体系及开发新一代外泌体培养添加剂提供了新的研究思路。

综上所述，该研究通过外泌体蛋白组学、多数据库整合分析及功能验证，成功解析了人输卵管来源外泌体促进IVF胚胎发育的关键分子机制，为优化胚胎培养体系及外泌体功能研究提供了新的思路。华盈生物依托成熟的外泌体蛋白组学技术平台，可提供从外泌体分离鉴定、Label-free蛋白组学检测到生物信息学分析的一站式解决方案，助力科研人员高效挖掘功能蛋白，加速基础研究与临床转化。

|   相关文献

Li Y, Xiong W, Gao L, et al. Extracellular Vesicles From Human Fallopian Tubes Enhance IVF Embryo Development and Contain Functional Proteins Including YWHAZ. J Extracell Vesicles. 2026;15(7):e70337. doi:10.1002/jev2.70337