Trophoblast Cell-Surface Antigen 2（TROP2，由 TACSTD2 基因编码）是一种最初在小鼠滋养层细胞中发现的I型跨膜糖蛋白。近年来，TROP2被揭示为一个在多种上皮来源恶性肿瘤（包括非小细胞肺癌、结直肠癌、三阴性乳腺癌等）中广泛过表达的细胞表面抗原——其胞外域含有一个保守的甲状腺球蛋白样I型结构域，可介导高效的抗体结合和内化，使其成为抗体偶联药物（ADC）开发的理想靶点。

Structure of TROP2 （引自Goldenberg DM et al. 2018）

2026年7月，两篇发表于顶级期刊的TROP2 ADC研究相继发表，分别来自中国中山大学肿瘤防治中心张力/方文峰团队（Cancer Cell）和德国海德堡大学Rene Jackstadt团队（Nature）。两篇研究从迥异的生物学视角出发——药物耐受持久细胞（DTP）的适应性调控与肿瘤细胞状态的可塑性重塑——共同揭示了TROP2作为治疗耐药"阿喀琉斯之踵"的核心地位，并通过TROP2靶向ADC的临床前和临床数据，展示了将肿瘤生物学机制转化为治疗策略的完整图景。

|   1、TROP2 ADC靶向DTP细胞延缓EGFR-TKI耐药

EGFR突变型非小细胞肺癌（NSCLC）的一线治疗以EGFR-TKI（如奥希替尼）为标准方案。然而，尽管初始疗效显著，耐药几乎不可避免。药物耐受持久细胞（Drug-Tolerant Persister cells, DTP）是近年来耐药研究领域的核心概念——这些细胞通过非遗传性转录重编程、表观遗传修饰和代谢可塑性，在TKI致死剂量下进入可逆的静止状态，成为获得性耐药的"种子库"。然而，迄今尚无专门针对DTP细胞的获批疗法。研究团队提出的核心假说是：DTP形成过程中可能伴随特定膜表面蛋白的上调，从而构成ADC靶向治疗的暴露性漏洞。

TROP2在DTP中保守性上调。通过多模型转录组学整合分析，结合人类膜蛋白数据库的系统筛选，TACSTD2 在所有统计框架下均排名第一。TROP2蛋白水平在体外和体内DTP状态下均显著升高，且这种上调在药物撤退后完全可逆，验证了TROP2作为DTP动态生物标志物的潜力。研究揭示了EGFR-TKI抑制MAPK通路，失活ERK，从而改变c-Myc蛋白磷酸化，促进泛素化降解。c-Myc下降，解除对TACSTD2启动子的转录抑制，导致TROP2上调。这一机制解释了为什么TKI治疗在关闭促癌信号的同时，反而"暴露"了一个可被ADC利用的表面靶点，研究团队将其概括为"诱导-靶向-杀伤"（induce-target-kill）策略。

TROP2 ADC（sac-TMT）对奥希替尼耐受细胞具有显著杀伤活性，联合用药在H1975和PC9细胞系中有效抑制DTP形成。联合方案在CDX模型中实现显著肿瘤消退，药物撤退实验显示，联合组肿瘤复发显著延迟。在4例患者来源类器官（LCO）模型中，联合治疗均显示优于奥希替尼单药的抗肿瘤活性。在一项评估一线sac-TMT联合奥希替尼治疗晚期EGFR突变NSCLC的II期研究中，67例可评估患者的客观缓解率（ORR）为73.1%，疾病控制率（DCR）为97.0%（65/67；95% CI, 89.6-99.6）。安全性可耐受，最常见≥3级TRAE为中性粒细胞减少（32.8%）、白细胞减少（13.4%）和口腔炎（11.9%）。

|   2、TROP2靶向揭示结直肠癌中治疗驱动的细胞状态动态

结直肠癌（CRC）作为全球癌症死亡的第二大原因，其微卫星稳定型（MSS，约占CRC的90%）对标准化疗联合方案（FOLFOX/FOLFIRI）的耐药机制长期未明。近年来，单细胞组学研究揭示了CRC中多种预后不良的细胞状态——均特征性地表现为低WNT通路活性。研究团队提出的核心假说是：这些有害的WNT^low fetal-like肿瘤细胞状态聚集于某一特定细胞表面抗原，从而可用ADC实现精准清除。

TROP2定义预后不良的CRC细胞群体。在1336例CRC患者的16个公开数据集中，TACSTD2 是唯一一个与缩短无复发生存期显著相关的膜蛋白基因。在246例病例-对照队列中，TROP2高表达与远处转移显著正相关。在II期pT3/4 CRC中，TROP2高表达患者无病生存期显著缩短。单细胞RNA测序揭示，CRC上皮肿瘤细胞中存在两个近乎互斥的群体：LGR5⁺ ISC样细胞（高WNT活性、增殖性）和TROP2⁺ fetal/HRC样细胞（低WNT活性、高复发特征）。两者之间存在显著的可塑性互变——这是一个关键的治疗切入点。功能实验证明了TROP2⁺细胞的类器官形成效率显著高于TROP2^-细胞。TROP2⁺细胞具有更强的肿瘤起始能力（CSC频率更高），与转移灶形成显著相关。

化疗驱动TROP2⁺细胞诱导，TROP2 ADC重塑细胞状态。5-FU或FOLFOX处理显著上调CRC类器官中的TROP2表达，诱导fetal/HRC细胞状态的扩增，这解释了化疗后残余病灶的侵袭性增强。TROP2 ADC（SG/Trodelvy）可高效杀伤TROP2⁺细胞，并显著重塑肿瘤细胞状态组成：fetal/HRC细胞减少，LGR5⁺ ISC比例相对恢复。体内PDOX模型中，化疗联合TROP2 ADC显著优于任一单药，联合治疗有效抑制肝转移灶的生长。

临床转化的核心挑战

尽管两篇论文均展示了令人信服的临床前和早期临床数据，临床转化仍面临多重关键挑战。其中脱靶毒性是ADC安全性的首要命题。ADC的脱靶毒性机制较为复杂，涉及抗体脱靶结合、连接子-载荷不稳定导致的循环中payload提前释放和非靶细胞通过Fc受体或胞饮摄取ADC三种主要途径。其中，抗体组分的脱靶结合是最根本的靶点特异性问题。

(1) 抗体交叉反应的盲区。TROP2 ADC的核心组件是hRS7人源化单克隆抗体。该抗体在临床前开发阶段仅通过传统IHC组织交叉反应（TCR）和有限的ELISA检测进行了特异性评估。然而，传统IHC受限于固定化抗原表位破坏、低丰度靶点检测灵敏度不足以及无法鉴定结合蛋白的分子身份等固有问题——组织切片上的"阳性染色"意味着存在结合信号，但无法回答"结合的是哪个蛋白"这一核心问题。

(2) 靶点相关毒性（On-target toxicity）与脱靶毒性（Off-target toxicity）的鉴别。TROP2在部分正常组织存在生理性低表达，这在相关临床试验中已被观察到与口腔炎/皮疹等不良事件相关。然而，当ADC在非预期组织（如肝窦内皮、心肌细胞）中产生毒性时，在缺乏系统特异性数据的情况下，难以区分是"低丰度靶点介导的on-target效应"还是"交叉反应导致的off-target效应"——这两种情况对应完全不同的风险管理策略。

(3) hRS7抗体骨架的跨癌种复用风险。TROP2 ADC共同使用hRS7抗体骨架，而该抗体最初的脱靶评估可能未覆盖所有现适应症相关的组织安全性考量。

Membrane Proteome Array（MPA）膜蛋白质组芯片 —— ADC脱靶效应的系统性解决方案

MPA平台由美国Integral Molecular公司开发，是目前业界领先的抗体类治疗药物特异性分析平台，已被FDA的ISTAND（Innovative Science and Technology Approaches for New Drugs）试点项目接纳为首个药物开发工具（Drug Development Tool, DDT）。

MPA平台的技术原理与核心优势

1.覆盖约6,000种人类膜蛋白（占人类膜蛋白质组的94%），联合可选的分泌蛋白质组库（SPL）后总覆盖超过7,000种蛋白；

2.基于活细胞（未固定的HEK-293或QT6禽类细胞）的384孔阵列格式，每孔瞬时转染表达单一全长膜蛋白——保留天然蛋白构象，避免固定化导致的表位破坏或暴露（传统组织交叉反应性[TCR]研究中使用的固定细胞/组织切片已知会产生假阳性和假阴性）；

3.高灵敏度流式细胞术检测，可定量分析结合强度和亚细胞定位模式；

4.覆盖GPCRs、离子通道、转运体、单次跨膜蛋白和整合素/TCR异源复合物等所有主要膜蛋白类别。

MPA在TROP2 ADC临床转化中的潜在应用路径

（1）hRS7抗体骨架的全谱系特异性分析。当前所有获批和在研的TROP2 ADC均基于共同的hRS7人源化抗体骨架，但该抗体的全膜蛋白质组脱靶结合谱从未被系统评估。MPA建议对TROP2 ADC的完整抗体或Fab/scFv片段测试对约6,000种人类膜蛋白的结合情况，系统识别"所有潜在的非TROP2脱靶蛋白"。这一数据对于：(a) 解释ADC临床试验中观察到的非预期毒性；(b) 区分on-target（低丰度TROP2生理表达）和off-target（交叉反应）毒性机制；(c) 指导下一代TROP2抗体的工程化改造（去除脱靶结合表位）均具有关键价值。

（2）组织安全性数据的蛋白质身份解析——从"未知信号"到"已知靶点"。传统IHC/TCR研究能告知在某组织切片上有结合信号，但无法鉴定结合的分子身份。以sac-TMT临床试验中观察到的口腔炎为例——它究竟是TROP2在口腔黏膜的生理表达（on-target），还是hRS7与口腔黏膜特异性表达的某未知膜蛋白的交叉反应（off-target）？不同答案对应完全不同的风险管理策略：前者需控制剂量而非更换靶点，后者则提示抗体需要工程化改造。MPA将组织水平的"未知信号"解析为蛋白水平的"已知身份"。

（3）跨适应症扩展的安全性预评。TROP2 ADC正在从乳腺癌向NSCLC、CRC、尿路上皮癌等多癌种快速扩展。不同癌种患者群体的正常组织表达谱和合并用药背景各异，可能暴露在单适应症临床试验中未被检测的脱靶毒性。MPA可以在进入新适应症临床试验前提供全面的脱靶结合谱数据，前瞻性预警潜在的器官特异性毒性风险。

（4）监管申报的数据支撑。FDA 2024年1月发布的CAR-T指南已将蛋白质阵列明确列为TCR研究的替代方法。在ADC领域，MPA同样可提供满足监管要求的抗体特异性数据。MPA数据可作为支持FIH（首次人体试验）起始剂量计算和安全性监测计划的重要依据。

DTP/细胞状态场景下MPA的特殊价值

TROP2 ADC面临一个独特的生物学背景——治疗本身会改变靶点的表达格局。TKI/化疗处理后，TROP2在DTP细胞和fetal/HRC细胞中显著上调，但同时也可能诱导其他膜蛋白的表达改变。这意味着传统在"稳态"肿瘤细胞中进行的脱靶评估可能遗漏"治疗诱导型"脱靶蛋白。MPA可以在异源细胞系统中独立评估抗体对每个单一蛋白的结合，不受细胞内信号状态的影响。结合DTP/化疗处理细胞的膜蛋白质组学数据，可以交叉验证MPA筛出的潜在脱靶靶点是否在治疗压力下上调——生成"动态脱靶风险评估"的全景图。

|   讨论与总结

两篇2026年顶级期刊论文从NSCLC的DTP生物学和CRC的细胞状态可塑性两个角度，独立揭示了TROP2作为治疗耐药核心节点的关键作用，并验证了TROP2 ADC联合标准治疗的转化潜力。从sac-TMT联合奥希替尼的II期临床ORR 73.1%，到SG联合FOLFOX在CRC PDOX模型中的显著转移抑制，TROP2 ADC正处于从"单药后线"到"联合前线"的范式转变之中。然而，这种快速扩张的应用版图对ADC的安全性评估深度提出了更高要求。MPA膜蛋白质组芯片以其6,000+膜蛋白的全覆盖、活细胞天然构象和定量结合分析的核心优势，可以为TROP2 ADC的脱靶风险评估提供传统方法无法企及的系统性视角。从hRS7抗体骨架的全谱系筛查，到跨适应症扩展的前瞻安全性预警，再到监管申报的数据支撑，MPA有望成为TROP2 ADC临床转化路径中不可或缺的标准化安全性评估工具。

华盈生物（Wayen Biotechnologies）自2021年3月起获得Integral Molecular的中国区认证服务商授权（Exclusive Collaboration Relationship），为中国研发团队提供MPA全流程技术服务——从样本接收到实验执行，从数据分析到报告交付，确保中国客户获得与美国同行同等品质和便捷的服务体验。

|   参考文献

[1] Liao J, Yao W, Yu Y, et al. Targeting TROP2 in drug-tolerant persister cells delays EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance in non-small-cell lung cancer. Cancer Cell. 2026;44:1401-1417. doi: 10.1016/j.ccell.2026.05.020.

[2] Vaquero-Siguero N, Georgakopoulos N, Puschhof MC, et al. TROP2 targeting reveals therapy-driven cell state dynamics in colorectal cancer. Nature. 2026. doi: 10.1038/s41586-026-10705-2.