然而，解析信号通路的磷酸化全景图谱一直是个技术难题。传统的Western blot一次只能检测寥寥数个蛋白的磷酸化状态，磷酸化质谱虽覆盖面广，却受限于周期长且数据深度依赖生物信息学分析。"如何在海量的磷酸化事件中，快速、经济地锁定真正驱动表型的核心信号轴？"——这几乎是每一位从事信号转导研究者的共同痛点。

以PEX100和CSP100 Plus为代表的高通量磷酸化抗体芯片，通过在固相载体上预点阵数百至上千种高特异性磷酸化抗体，让研究者仅需一次实验、少量样本即可同时绘制覆盖30余条信号通路的磷酸化景观。更关键的是，这种"宽筛窄验"的策略天然契合了顶刊的叙事逻辑——先用芯片做无偏性全局筛选，锁定差异通路，再用经典生化手段层层验证，形成一条从"发现"到"机制"的完整证据链。

近期，华盈生物信号通路磷酸化抗体芯片检测服务助力东南大学医学院/江苏省重症医学重点实验室王立新团队、中国医学科学院药物研究所陈晓光/金晶团队分别在《Cancer Research》（IF:22.6）和《Journal of Advanced Research》(IF:17.1)发表重要研究成果。

化疗诱导的肿瘤凋亡体会释放大量凋亡小体（Apoptotic Bodies, ABs），这些ABs虽富含肿瘤抗原，却具有免疫抑制性，会损害树突状细胞（DC）的成熟和抗原呈递功能，严重限制了化疗联合免疫治疗或序贯免疫治疗的疗效。胸腺肽α-1（Thymosin Alpha-1, Tα-1）是一种由28个氨基酸组成的内源性肽类激素，具有免疫调节和组织保护功能，但其在肿瘤免疫中的具体作用机制一直未被阐明。近期，东南大学医学院/江苏省重症医学重点实验室王立新团队在《Cancer Research》上发表了题为"Thymosin Alpha-1 Restores Chemotherapy-Induced Antitumor Immunity by Chaperoning a MicroRNA Ligand of TLR7 in Dendritic Cells"的研究论文，揭示了Tα-1作为内源性microRNA分子伴侣的全新功能。

研究者首先发现多种肿瘤患者化疗后外周血中Tα-1水平显著降低，提示化疗可能消耗内源性Tα-1。在荷瘤小鼠模型中，外源性补充Tα-1与化疗联用，显著促进了传统1型DC（cDC1）的成熟，增强了肿瘤抗原交叉呈递以及抗肿瘤特异性CD8⁺ T细胞和Th1细胞的活化，从而显著改善了抗肿瘤免疫应答和肿瘤控制。机制上，Tα-1可与肿瘤ABs结合，并在DC吞噬ABs后进入内溶酶体区室，与ABs携带的microRNA（特别是miR-146a-5p）结合，保护其免受溶酶体RNase A介导的降解，从而使miR-146a-5p能够激活Toll样受体7（TLR7），启动DC成熟、淋巴结迁移和肿瘤抗原呈递的关键程序。研究进一步证实，Tα-1的治疗效果依赖于肿瘤中miR-146a-5p的表达水平和TLR7信号通路。

华盈生物为该研究提供了CSP100 Plus磷酸化抗体芯片检测服务。研究利用CSP100 Plus磷酸化抗体芯片，系统分析了DC吞噬ABs后及Tα-1处理条件下的磷酸化信号通路变化。芯片检测结果显示，ABs单独处理改变了BMDCs中93个磷酸化位点（42个上调、51个下调），而ABs/Tα-1联合处理与ABs单独处理相比，改变了37个磷酸化位点。通过磷酸化抗体芯片分析，研究团队快速锁定了TLR信号通路、cGMP-PKG信号通路和mTOR信号通路等关键信号网络，发现Tα-1可逆转ABs对TAK1、IκBα、NF-κB（p65）和JunB磷酸化的抑制作用。CSP100 Plus芯片的高通量、高覆盖度特性，使研究者能够在一次实验中同时检测数百个磷酸化位点的变化，极大加速了关键信号通路的筛选和发现，为后续深入的机制验证提供了明确方向。

LAG-3（Lymphocyte Activation Gene-3）是继CTLA-4和PD-1之后备受关注的免疫检查点分子，目前已有多个抗LAG-3抗体进入临床应用或临床试验。然而，LAG-3的功能研究主要集中在免疫细胞上，其在肿瘤细胞自身表达的功能和意义尚不清楚。近期，中国医学科学院药物研究所陈晓光/金晶团队在《Journal of Advanced Research》上发表了题为"Melanoma cell-derived LAG-3 enhances CXCL1/8-driven MDSCs recruitment and immune escape via TRIM28-mediated IκBα degradation"的研究论文，首次系统揭示了黑色素瘤细胞自身表达的LAG-3在驱动免疫逃逸中的关键作用。

研究者通过TCGA、CCLE数据库分析及组织芯片免疫组化检测，发现LAG-3在黑色素瘤细胞中存在广泛表达，且肿瘤细胞LAG-3高表达与患者不良预后显著相关。功能实验表明，肿瘤细胞来源的LAG-3可显著促进CXCL1和CXCL8的转录和分泌，通过CXCL1/8-CXCR2趋化轴招募髓源性抑制细胞（MDSCs）至肿瘤微环境，同时导致CD8⁺ T细胞功能耗竭，形成深度免疫抑制状态。机制研究方面，研究团队利用磷酸化抗体芯片对LAG-3过表达的A375黑色素瘤细胞进行了系统分析，发现LAG-3上调可激活MAPK、NF-κB、AKT/PKB及JAK-STAT等多条信号通路。深入研究揭示，LAG-3通过促进TRIM28介导的IκBα泛素化降解，从而激活NF-κB信号通路，驱动CXCL1/8的转录表达。治疗策略方面，靶向CXCL1/8-CXCR2轴联合抗LAG-3抗体在LAG-3高表达黑色素瘤模型中展现出显著的协同抗肿瘤效应，为临床LAG-3靶向治疗提供了新的生物标志物和联合用药策略。

华盈生物为该研究提供了PEX100磷酸化抗体芯片检测服务。研究采用PEX100磷酸化抗体芯片，该芯片包含1318种高特异性磷酸化抗体，覆盖452个关键信号蛋白的583个磷酸化位点，涵盖MAPK、NF-κB、AKT/PKB、JAK-STAT、Wnt、TGF-β等30余条肿瘤相关信号通路。通过对比LAG-3过表达与载体对照A375细胞的磷酸化谱差异，研究者发现LAG-3过表达显著改变了多个经典信号通路蛋白的磷酸化水平。PEX100芯片的高通量、高覆盖度和高灵敏度特性，使研究者在一次实验中即可获得全信号通路的磷酸化景观，显著加速了从表型到机制的转化研究进程。进一步通过Western blot验证，确认了ERK1/2、p65、AKT和STAT3的磷酸化水平升高，最终聚焦于TRIM28-IκBα-NF-κB这一全新的调控轴。

信号通路磷酸化抗体芯片在生物医学研究中的重要应用价值：1. 高通量与高覆盖度：PEX100芯片包含1318种磷酸化抗体，覆盖30余条信号通路；CSP100 Plus芯片同样具备数百个磷酸化位点的检测能力。一次实验即可绘制全信号通路的磷酸化景观，大幅缩短从表型观察到机制发现的周期。2. 无偏性筛选优势：磷酸化抗体芯片无需预设候选通路，能够在全局水平上发现差异磷酸化事件，帮助研究者快速锁定关键信号节点。3. 广泛的研究适用性：PEX100/CSP100 Plus芯片在肿瘤学、免疫学、纤维化疾病等多个研究方向上均具有卓越的技术适用性。4. 从筛选到验证的桥梁作用：芯片提供的磷酸化差异图谱为后续Western blot验证、信号通路抑制/激活实验、体内功能实验等提供了明确的方向指引，实现了从高通量筛选到精细机制验证的高效衔接。

|   参考文献

1.Wei Y, Chen J, Zhang Y, et al. Thymosin Alpha-1 Restores Chemotherapy-Induced Antitumor Immunity by Chaperoning a MicroRNA Ligand of TLR7 in Dendritic Cells. Cancer Res 2026.

2.Xue N, Gong H, Chen W, et al. Melanoma cell-derived LAG-3 enhances CXCL1/8-driven MDSCs recruitment and immune escape via TRIM28-mediated IκBα degradation. J Adv Res. 2026:S2090-1232(26)00516-3.