目前用于预防和治疗肝脂代谢紊乱的策略主要围绕HMG-CoA还原酶、过氧化物酶增殖活性受体、原蛋白转换酶和脂肪酶展开。但仍需寻找新的靶点以克服转氨酶水平升高、横纹肌溶解、胃肠道症状和皮疹等潜在的不良反应。

图1 ART改善肝脂代谢紊乱

PVN区域的TRH神经元对甲状腺激素水平的中枢调节已被广泛认识，HFD小鼠下丘脑室旁核有Iba1的表达(小胶质细胞的标志)，表明脂代谢紊乱加速了小胶质细胞介导的神经炎症。ART显著降低Iba1的表达并改善小胶质细胞的形态(图3A)。HFD组的下丘脑室旁核小胶质细胞炎症介质(TNF-α和IL-6)在ART治疗后明显减少（图2B-C）。经棕榈酸(PA)处理的小胶质细胞条件培养液(CM-PA)可降低神经元存活率和TRH的表达，而PA/ART共同处理的小胶质细胞衍生条件培养液(CM-ART)可显著增加神经元的存活率和TRH的表达（图2D-E）。

这些数据表明，小胶质细胞介导的神经炎症在ART保护的下丘脑室旁核TRH神经元中起着至关重要的作用。

作者使用TPP技术联合CMAP分析鉴定出了118个潜在的ART结合蛋白(图3A和B)。生物学功能注释揭示了三个主要的炎症相关蛋白，包括PKCδ, Serpinb1a 和Serpinb6。PKC在以前的报告中具有强的成药性，暗示ART可能作为一种潜在的PKC抑制剂。接下来，CETSA实验,pull down实验，和DARTS实验均证实了PKCδ是ART的直接靶点（图3C-E）。Pull down实验表明ART与独特的PKCδ的C1结构域特异相互作用（图3F和G）。

作者观察到PA处理显著增加了小胶质细胞中PKCδ的磷酸化，这一作用被ART逆转(图4A)。而蛋白质的棕榈酰化对磷酸化的调节起着至关重要的作用，作者推测PKCδ的磷酸化可能通过其先前的棕榈酰化而受到潜在的调节。酰基-生物素交换分析证实ART逆转PA导致的小胶质细胞中PKCδ的棕榈酰化（图4B）。蛋白质棕榈酰化阻滞剂2BP处理显著逆转ART介导的对NO、TNF-α和IL-6释放的抑制(图4C-E)，敲除ZDHHC5后，PA诱导的PKCδ棕榈酰化显著减弱。同时，ART介导的PKCδ磷酸化抑制也被Zdhhc5基因敲除显著阻断（图4F），Co-IP实验还表明，ART可以抑制PKCδ-ZDHHC5的相互作用(图4G)。

图4 ART通过阻断PKCδ的棕榈酰化来抑制PKCδ的磷酸化

本文发现了蒿甲醚ART能特异性地抑制小胶质细胞激活并改善脂代谢，TPP鉴定出ART的潜在靶点PKCδ。通过CETSA，pull down和DARTS实验证实了PKCδ是ART的直接靶点。此外，研究人员还利用整体蛋白质组学分析鉴定出了ZDHHC5蛋白是下丘脑中最重要的棕榈酰基转移酶，并通过敲除ZDHHC5验证了其对PKCδ磷酸化和神经炎症信号通路的调控作用。

总的来说，下丘脑小胶质细胞PKCδ的棕榈酰化可能通过下丘脑-肝脏通讯调节外周脂肪代谢，作者的研究为脂肪肝疾病的治疗提供了一个有前景的靶点。

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