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实验原料：粪便（新鲜或者4℃存储样品）
试剂耗材：1，外泌体提取试剂盒；2，针式过滤器(0.45μm)；3，PBS缓冲液（2℃-8℃预冷）
实验步骤：
一、 样品预处理：
（1）粪便样本收集在无菌的宽口容器中，立即使用（收集样品后置于冰上）或冷藏(4°C)。
（2）使用勺子将3g的粪便转移到预先称重的离心管中，向试管中加入预冷(2℃-8℃)的30毫升无内毒素PBS（按照每1g粪便对应10毫升PBS加入）。
（3）通过涡旋振荡器充分混匀粪便样本5分钟。在此步骤中，将高速离心机和离心转子冷却至4°C。
（4）将混匀粪便的离心管放入高速离心机中，在4°C，8000g的温度下离心10分钟。
（5）收集滤过液，使用移液器将其转移到新的离心管中，在4°C，10000g的温度下离心10分钟。
（6）收集滤过液，通过针式过滤器(0.45μm)进行过滤，收集滤过液。
二、 提取外泌体：
（1）滤过液预处理：在去除杂质的离心滤过液中加入Exosome Concentration Solution（ECS试剂），具体的加入剂量如下：（其他剂量请根据表中的试剂用量等比例换算
样品名称 粪便滤过液 样品剂量 20 m 加入ECS剂量 5 mL
（2）溶液混合：加入ECS试剂后将离心管盖紧，通过涡旋振荡器混匀1 min，再放置于4℃静置至少2 h；（增加静置时间可提高外泌体得率，但静置时间不可超过24h）
（3）沉淀外泌体：取出装有混合液的离心管于4℃以10000 g离心60 min，弃上清，沉淀中富含外泌体颗粒；（注：尽可能吸净滤过液）
（4）外泌体重悬：取1×PBS均匀吹打离心沉淀物（具体加入剂量如下表），待其溶解后，将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中；
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