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组织提取外泌体的方法

组织提取外泌体的方法

【概要描述】简单介绍了组织提取外泌体的方法

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  • 分类:技术解答
  • 作者:华盈生物
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  • 发布时间:2023-09-19 13:43
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外泌体是细胞间通讯的重要媒介,参与了多种疾病的生理和病理过程。相对于细胞上清样本,组织外泌体一方面减少了大量体外培养细胞的工作,另一方面利用组织提取得到的外泌体,可能更接近于生理状态下的外泌体,也有利于研究外泌体的功能,组织外泌体相比体液外泌体可能更加容易协助阐释疾病的发病机制。

目前组织外泌体提取的方法包括三个过程:首先,组织切片,使组织具有更大的表面积。其次,在细胞培养基中利用组织解离酶与组织切片孵育进行消化,经水浴、反复轻轻上下颠倒,再用移液枪间断缓慢吹吸至消化结束,目的是使组织外泌体扩散到培养基中。最后,通过密度梯度离心、分子尺寸排阻等方法从培养基中分离外泌体,用PBS重悬外泌体,用重悬后的外泌体可以进行透射电镜、纳米粒子检测和western blot鉴定。需要注意的是组织切片和组织消化过程中避免细胞的破碎,因为细胞破碎后会有大量的囊泡产生。

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