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PCF空间单细胞蛋白组如何解决组织自发荧光的问题？
【概要描述】简单介绍了PCF空间单细胞蛋白组如何解决组织自发荧光的问题。
- 分类：单细胞技术FAQ
- 作者：华盈生物
- 来源：
- 发布时间：2023-08-11 10:31
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自发荧光在组织切片的荧光成像检测中是一个非常严重的问题，特别是AF488和 ATTO550两个通道。并且FFPE样本要比FF样本的自发荧光现象严重。因此PCF空间单细胞蛋白组在检测FFPE样本时用AF750通道代替AF488。其次PCF空间单细胞蛋白组推荐在进行抗体验证或者执行PCF多轮循环检测前对同一连续组织切片进行预先的自发荧光检测，评估自发荧光水平, 我们推荐可以预先利用淬灭试剂预先处理组织切片已达到消除或者降低自发荧光。另外PCF空间单细胞蛋白组进行多轮循环检测时都会对空白切片进行成像，数据质控系统会在数据分析时通过系统算法扣除自发荧光的背景。最后对于高自发荧光的样本，我们建议使用较高发射波长的荧光基团检测低丰度的蛋白标志，例如应用Cy5检测FF样本的低丰度蛋白，AF750检测FFPE样本的低丰度蛋白。
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