全身用类固醇是治疗急性移植物抗宿主病（aGVHD）的首选疗法，但类固醇耐药或依赖（SR/D）的患者约占50%。芦可替尼（ruxolitinib）是唯一经FDA和EMA批准可用于治疗SR/D aGVHD患者的药物，III期REACH2试验表明其治疗响应率显著高于现有最佳可用疗法（BAT），识别与SR/D aGVHD疗效相关的生物标志物及患者特征可指导治疗决策。

2023年6月，Blood杂志（IF=20.3）在线发表题为“Prognostic Value of Blood Biomarkers in Steroid-Refractory/Dependent Acute Graft-vs-Host Disease: A REACH2 Analysis”的文章，发现用于类固醇疗法抵抗/依赖的急性移植物抗宿主病（SR/D aGVHD）的疗效预测的生物标志物。

REACH2试验中符合条件的患者年龄≥12岁，接受过异基因造血干细胞移植（allo-HSCT），并出现需要全身免疫抑制治疗的II-IV级SR/D aGVHD。患者被随机（1:1；按aGVHD等级分层）接受芦可替尼10 mg每日两次或最佳可用疗法（BAT）。在任一治疗组中，患者都可以继续接受类固醇±钙调神经磷酸酶抑制剂治疗（图1）。

图1 样本设计

1、差异生物标志物分析

最终分析的21个生物标志物中，有8个（IL-8、ST2、HGF、REG-3α、IL-6、IL-2Rα、TNFRSF1A和B细胞marker）在基线（图 2A）和第14天（图 2B）时有反应者和无反应者之间的血浆浓度存在显著差异。4个（TIM-3、SPP1、PI3和CXCL10）血浆浓度仅在第14天在应答者和无应答者之间存在显著差异。对于这两个时间点，患者亚群之间存在显著差异的生物标志物在无应答者中比在应答者中具有更高的水平。治疗方式、移植前调理方法、皮肤受累程度、年龄、基线和第14天较低的aGVHD相关细胞因子/趋化因子水平、以及基线较低的免疫细胞标记等特征与标志物与治疗响应率正相关。

图2 差异生物标志物分析

2、构建模型及模型变量的重要性和系数

使用基线（n=295）和第14天（n=242）数据利用上述特征及标志物在基线和第14天分别构建治疗响应预测模型对于基线模型，治疗是aGVHD生物标志物的第一主成分，年龄和预处理方案是模型中最重要的协变量（图3A）。随机分配至鲁索替尼与第28天临床反应概率的增加相关，清髓性预处理方案与第28天临床反应概率降低相关（图 3C）。对于第14天模型，最重要的协变量是治疗，第一主成分是aGVHD基线，皮肤受累、调理方案（图3B）。与基线模型一样，鲁索替尼治疗与第28天临床反应概率增加相关，而清髓性预处理方案与反应概率降低相关，基线时的皮肤受累也与第28天的临床反应呈正相关（图3D）。

图3 构建模型及模型变量的重要性和系数

3、验证拟合模型

使用AUROC值评估2个模型的准确性。基线模型的AUROC值为0.788。第14天模型的AUROC值为0.864。对于基线模型中>0.4的概率，估计的响应概率似乎是无偏的，但对于<0.4的概率，往往会被高估（图4A）。对于第14天模型，有轻微迹象表明未校正概率存在过度拟合，但偏差校正概率与实际响应率一致（图4B）。

图4 验证拟合模型

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