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药物靶点筛选技术 DARTS 原理是什么?
【概要描述】简单介绍了药物靶点筛选技术 DARTS 原理。
- 分类:小分子药物靶点FAQ
- 作者:华盈生物
- 来源:
- 发布时间:2023-08-01 11:11
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药物靶点筛选技术 DARTS的基本原理:
药物处理后,与药物具有亲和反应的靶蛋白的结构构象更为稳定,不易被广谱的蛋白水解酶水解成单独的小肽段,从而该药物的靶蛋白完整被保留下来可以在后续的质谱检测中被检测到,从而确定该药物的具体靶点。
具体实验操作为:1)将小分子药物与靶细胞蛋白样品共孵育一定时间;2)加入蛋白酶(该技术常用的蛋白酶有枯草杆菌蛋白酶、嗜热菌蛋白酶、链霉菌蛋白酶,更建议使用链霉菌蛋白酶混合酶或多种蛋白酶混合物来进行水解,既保证对靶标蛋白的保护,同时充分水解非靶标蛋白)进行水解消化;3)进行凝胶电泳,由于小分子药物与靶蛋白结合后可以保护靶蛋白使其对蛋白酶的敏感性降低,所以在后续的凝胶电泳染色中,与对照组相比实验组可能有特异性条带;4)进行质谱鉴定。
DARTS做为药物靶点筛选的一种方法,无需对药物进行修饰,操作更加简便。

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