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一般在外泌体样品中加入等体积RIPA(强)裂解液,振荡混匀,4 ℃裂解30 min(每10min震荡一次),13,200 rpm,4 ℃,离心15 min,将上清转移至新的离心管中,即为提取的外泌体蛋白。RIPA裂解液是一类经典的细胞和组织快速裂解液,对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强的裂解作用,提取的蛋白样品多用于Western blot等检测。RIPA裂解液根据裂解强度大致可以分为强、中、弱三类,其中RIPA强的裂解能力相对更强一些(RIPA裂解液(强)的主要成分为1% Triton X-100,0.1% SDS和1% Sodium Deoxycholate;RIPA裂解液(中)的主要成分为1% NP-40,0.1% SDS和0.5% Sodium Deoxycholate;RIPA裂解液(弱)的主要成分为1% NP-40和0.25% Sodium Deoxycholate)。
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