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PhenoCycle-Fusion检测流程是什么?
【概要描述】简单介绍了PhenoCycle-Fusion的检测流程。
- 分类:单细胞技术FAQ
- 作者:华盈生物
- 来源:
- 发布时间:2023-07-19 10:06
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具体的流程为:第一步,把检测的抗体 panel 与切片进行一次性孵育。孵育的过程中抗体就会结合到相应的抗原上;第二步,开始进行第一轮的杂交显色。加入第一组3个荧光报告探针进行杂交,这3个探针结合3个不同抗体,并且这3个探针分别发出不同颜色的荧光。杂交好之后,用显微镜对切片进行拍照成像。接下来,把第一轮结合上的报告探针洗掉。在这一轮的杂交中,检测到了3种蛋白。然后进入第二轮的杂交显色。加入第二组的3个荧报告探针。把杂交、拍照、洗脱的这个过程重复再做一遍。检测到第二轮的另外3种蛋白。再接着,做三轮、第四轮,第 N 轮的杂交显色。这样,经过多轮的杂交显色,就可以把一个 panel 中所针对的全部蛋白都检测到。
注:荧光检测的通道有4种:分别为647,550,750和488通道,其中石蜡切片的自发荧光比较强,尤其是488通道,所以石蜡样本不用488通道,只用于冰冻切片。
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