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外泌体蛋白组学服务中外泌体的提取方式介绍
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【概要描述】多种细胞在正常和病理条件下都能分泌外泌体，外泌体蛋白组学服务主要来源于细胞内溶酶体颗粒内陷形成的液泡，在液泡外膜与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。
外泌体蛋白组学服务中外泌体的提取方式介绍
【概要描述】多种细胞在正常和病理条件下都能分泌外泌体，外泌体蛋白组学服务主要来源于细胞内溶酶体颗粒内陷形成的液泡，在液泡外膜与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。
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- 发布时间：2023-01-26 12:01
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外泌体是含有复杂RNA和蛋白质的小囊泡(30-150nm)，现在的外泌体是直径40-100nm的圆盘状囊泡，1983年，在绵羊网织红细胞中发现了外泌体，Johnstone于1987年将其命名为“外泌体”，多种细胞在正常和病理条件下都能分泌外泌体，外泌体蛋白组学服务主要来源于细胞内溶酶体颗粒内陷形成的液泡，在液泡外膜与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。
外泌体蛋白组学服务
所有培养的细胞类型都能分泌外泌体，外泌体天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁。它们分泌和摄取的精确分子机制以及它们的组成、“载体”和相应的功能才刚刚开始被研究。外泌体被认为是特定的分泌小泡，参与细胞间的通讯。人们对外泌体的兴趣越来越大，无论是研究它们的功能，还是了解如何在微创诊断的发展中使用它们。
外泌体蛋白组学服务中外泌体的提取方式是什么？下面我们来分析一下。
一、超速离心，这是提取外泌体比较常用的方法。这种方法获得的外泌体数量较多，但纯度不够。经电镜鉴定，发现外泌体聚集。由于微泡和外泌体没有统一的鉴别标准，有研究认为微泡不是这种方法获得的外泌体。
二、过滤离心，简单省时，不影响外泌体的生物活性，但也有纯度不够的问题。
三、密度梯度离心。该方法分离的外泌体纯度高，但前期准备工作复杂、耗时少。
四、免疫磁珠法，可以保证外泌体形态的完整性，特异性高，操作简单，不需要昂贵的仪器设备，而非中性的pH和生理盐浓度会影响外泌体的生物活性，不方便进行下一步实验。
五、PS亲和法，将PS(磷脂酰丝氨酸)与磁珠结合，利用亲和原理捕获胞外体囊泡外的PS。该方法类似于免疫磁珠法，获得的外泌体形态完整，纯度比较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射，2016.9《Scientific Reports》杂志发表了该方法的数据，表明PS法可以提取出纯度相当高的外泌体。
六、色谱法。这种方法分离的外泌体在电镜下大小均匀，但需要特殊设备，应用不广泛。
七、微流控分离法。这种方法通过负压、振荡等机械原理分离外泌体，大大提高了产量和纯度，但需要特殊设备的配合。
外泌体蛋白组学服务的仪器平台是什么？下面我们来分析一下。
外泌体蛋白组学服务用于蛋白质定量，蛋白肽用液相色谱-质谱(LC-MS)质谱分析，没有必要使用昂贵的稳定同位素标记作为内标，只需要分析大规模鉴定蛋白质时产生的质谱数据，并比较不同样品中相应肽段的信号强度，从而定量对应于肽段的蛋白质。
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