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信号通路磷酸化抗体芯片技术未来发展

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【概要描述】信号通路磷酸化抗体芯片除促进体细胞线粒体蛋白转译率升高,激活mTOR信号通路,从而引起细胞质蛋白转译率升高,平衡线粒体蛋白转译率升高带来的“负面影响”

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【概要描述】信号通路磷酸化抗体芯片除促进体细胞线粒体蛋白转译率升高,激活mTOR信号通路,从而引起细胞质蛋白转译率升高,平衡线粒体蛋白转译率升高带来的“负面影响”

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  • 发布时间:2022-09-08 10:33
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信号通路磷酸化抗体芯片技术未来发展

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信号通路磷酸化抗体芯片除促进体细胞线粒体蛋白转译率升高,激活mTOR信号通路,从而引起细胞质蛋白转译率升高,平衡线粒体蛋白转译率升高带来的“负面影响”,是一种新颖的进化适应机制。相反,信号通路磷酸化抗体芯片除虽然也促进了生细胞线粒体蛋白转译率的升高,但下调mTOR信号通路,未能引起细胞质蛋白转译率的升高,从而导致线粒体蛋白转译率升高,精子成熟过程受阻导致“情况失衡”,导致雄性小鼠不育。专门用于同时识别细胞裂解液中493/507种不同蛋白的相对磷酸化水平,发现不同处理下蛋白的磷酸化或去磷酸化情况,研究磷酸化修饰水平。可用于识别任何酪氨酸激酶或通路或药物/治疗的新的下游靶点,或为后续生物现象的进一步探索提供明确的研究方向。

 

RT-SQPCR定量检测Atp5d mRNA (mTOR敏感)的多核糖体分布,并检测细胞质翻译。结果证实:信号通路磷酸化抗体芯片除后,心肌组织中mTOR信号通路上调,导致ATP5D的细胞质翻译加速。相反,睾丸组织中mTOR信号通路的下调会导致ATP5D的细胞质翻译减少。这一结果进一步验证了研究者的推测。当mtEF4缺失时,体细胞激活mTOR信号通路,加速细胞质翻译,平衡线粒体翻译加速带来的变化。不幸的是,mtEF4缺失显著下调了生细胞中mTOR信号通路的活性,无法通过加速细胞质翻译来协调和平衡线粒体翻译速率的提高,然后导致雄性小鼠不育。从细胞膜、细胞质到细胞核,是由多条信号通路形成的复杂信号网络。细胞受到细胞外刺激后,信号网络通过级联放大、弥散调节等方式将信号传递到细胞内,引起一系列细胞综合反应。生物效应的发生往往涉及多个信号通路的同时激活,而可逆磷酸化是细胞中信号蛋白激活比较常见的节能调控。因此,寻找被激活的信号通路,乃至磷酸化调控的通路蛋白往往是生命科学研究的起点。利用专利的三维高分子膜技术,在底物上高密度结合1318种高特异性抗体,检测到432个信号蛋白的679个磷酸化位点。这些信号蛋白广泛参与许多重要的信号通路。针对每个特定的蛋白磷酸化位点,芯片分别设置一对抗体检测磷酸化状态和非磷酸化状态,提高了信号通路磷酸化抗体芯片检测的灵敏度和稳定性。单芯片实验可以实现多个信号通路的同时筛选和特定调制位点的明确定位,为生物现象的进一步探索提供了明确的研究方向。


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