蛋白芯片详细

蛋白质组芯片 > SPR分子动力学检测 > SPR分子动力学检测

    SPR分子动力学检测

     

    SPR分子动力学原理:


            光学表面等离子共振(SPR, Surface Plasmon Resonance)是一种光学物理现象。当偏振光以临界角入射到两种不同折射率的介质界面(比如玻璃表面的金或银镀层)时,可引起金属薄膜内自由电子的共振,使反射光在一定角度内大大减弱。其中,使反射光在一定角度内完全消失的入射角称为SPR角。可以通过监测生物反应过程中SPR角的动态变化,得到生物分子之间结合和相互作用的特异性信号  

    原理图.png

      
            利用SPR表面等离子共振这种特殊的物理现象,将一种生物分子(靶分子)偶联在生物传感器表面,再将含有另一种能与靶分子产生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流经传感器表面。分子间的结合引起传感器表面质量增加,导致折射指数按同样的比例增强,生物分子间反应的变化即被监测到。通过不同浓度梯度和温度梯度的分析物的注入,即可观察到分析物与靶分子的相互作用在分析物浓度或温度变化后引起的SPR角改变,进而可以绘制出两种分析物相互作用的SPR分子动力学曲线,计算出Kd 结合常数。SPR分子动力学技术已经成为目前定性和定量监测两种不同分子间结合程度的标准方法。

    SPR仪器设备:


    Biacore 3000 生物大分子相互作用分析仪

    分子量检测最低限制:100 Da

    检测折射率范围:1.33-1.40

    响应信号动态范围:1-70000 RU

    系统流速:20-30 µL/min

    样品注射体积:5-750 µL

    Biacore 3000仪器.png

    SPR技术特点:

     



    1. 通过传感芯片可实时、原位和动态监测生物分子间的相互作用过程,适用于各类生物体系的测定,小分子-蛋白质,蛋白质-蛋白质,DNA-蛋白质,DNA-DNA等;

    2. 研究抗原-抗体特异性、配体-受体相互作用、蛋白复合物;

    3. 样品无需标记,通过检测SPR角度变化,获得分析物的浓度、亲和力、动力学常数和特异性等信息;

    4. 对复合物的定量测定不干扰反应的平衡,确保检测结果的稳定可靠性;

    5. 实验设计方法灵活,提供高通量、高质量的分析数据

    传感图.png



    分析图.png

     

    SPR应用领域:



    SPR应用领域.png

     

    SPR相关文献:

    1. Lv Z, et al. Loss of Cell Surface CD47 Clustering Formation and Binding Avidity to SIRPα Facilitate ApoptoticCell Clearance by Macrophages. Jimmunol, 2015, 195(2): 661-71. (南京大学)

    2. Sulong Xiao, et al. Pentacyclic triterpenes grafted on CD cores to interfere with influenza virus entry: A dramatic multivalent effect. Biomaterials, 2016, 78: 74-85. 北京大学  

    3. Li Ma, et al. A Novel Small-molecule Tumor Necrosis Factor _ Inhibitor Attenuates Inflammation in a Hepatitis Mouse Model. The Journal of Biological Chemistry, 2014, 289 (18): 12457-12466. 中国医学科学院